Docosahexaenoic fatty acid nanoencapsulated with Anti-PECAM-1 as strategy to increase atherosclerotic plaque stability / Ácido graxo docosahexaenoico nanoencapsulado com anti-PECAM-1 como uma estratégia para aumentar a estabilidade de placas ateroscleróticas

Cardiovascular diseases (CVDs) are the main cause of mortality worldwide, being the ischemic heart disease responsible for 85% of deaths. Atherosclerosis is a chronic inflammation of the arteries that underlies ischemic forms of CVD and involves the innate and adaptive immune systems, from initial fatty streak formation to atherosclerotic plaque ruptures, which defines the beginning and end stages of disease, respectively. Recent research on the reduction of systemic inflammation in order to treat CVD is controversial, since results show that this reduced inflammation can also increase patient susceptibility to general infection. Therefore, new tissue-targeting strategies are necessary. Docosahexaenoic fatty acid (DHA) is a natural bioactive precursor of pro-resolving oxylipins that can reduce inflammation. Based on these factors, the objective of this study was to develop a nanocapsule containing algae oil as a DHA source and apply anti-PECAM-1 on its surface to drive it to the inflamed endothelium. Initially, a surface-functionalized metal-complex multi-wall nanocapsule containing algae oil in its nucleus (MLNC-DHA-a1) was developed. This nanocapsules presented a mean diameter of 163 ± 5 nm, was spherical in shape, showed 94.80% conjugation efficiency using 200 µg/mL of anti-PECAM-1 on the surface, and did not show significant toxicity toward HUVECs at concentrations from 0.14 to 2.90x1011 nanocapsules/mL. The nanocapsules were also stable for 2 h, sufficient time to allow for clinical applications. In cell viability assays, concentrations of 0.14 to 1.40x1011 nanocapsules/mL did not significantly affect the viability of immortalized murine macrophages (RAW 264.7) and U-937 cells after 24, 48, and 72 h of treatment. Finally, macrophages were incubated with 0.75x1011 MLNC-DHA-a1 nanocapsules/mL for 4 h and showed a significant uptake, observed using dark-field hyperspectral microscopy (CytoViva®). Once inside murine macrophages (RAW 264.7), MLNC-DHA-a1 nanocapsules promoted a strong increase in M2 phenotype polarization compared to non-treated control cells. Our results suggest that DHA-enriched algae oil, as part of a lipid core nanocapsules, does not reduce cell viability and improves macrophage phenotype, making it a promising potential therapy for controlling chronic inflammation and healing or stabilizing atherosclerotic plaques

As doenças cardiovasculares (DCVs) são a principal causa de mortalidade no mundo, sendo os eventos isquêmicos responsáveis por 85% das mortes. A aterosclerose é uma inflamação crônica das artérias associada aos eventos isquêmicos das DCVs, na qual o sistema imunológico inato e adaptativo estão envolvidos desde a formação inicial das estrias gordurosas até a ruptura das placas ateroscleróticas. Pesquisas recentes direcionadas à redução da inflamação sistêmica têm mostrado resultados controversos, pois essa abordagem pode aumentar a susceptibilidade do paciente a infecções. Nesse sentido, novas estratégias direcionadas ao tecido lesionado são necessárias. No que se refere a medicamentos anti-inflamatórios ou suplementos alimentares, o ácido docosaexaenóico (DHA) tem sido relatado como um precursor natural de oxilipinas pró- resolutivas. Baseado nesse contexto, o objetivo deste estudo foi desenvolver nanocápsulas contendo óleo de alga como fonte de DHA e vetorizar essas nanopartículas com o anticorpo antiPECAM-1 em sua superfície, visando direcioná-las ao endotélio inflamado. Inicialmente, a nanocápsula multiparede metal-complexa funcionalizada contendo óleo de alga em seu núcleo (MLNC-DHA-a1) foi desenvolvida, apresentando um diâmetro médio de 163 ± 5 nm, formato esférico, onde a eficiência de conjugação do anti-PECAM-1 (200 µg/mL) foi de 94,80% sem toxicidade significativa em HUVECs nas concentrações de 1.14 a 2.9 x 1011 nanocápsulas/mL. As nanocápsulas apresentaram uma estabilidade de 2h, o que representa tempo suficiente para a sua aplicação clínica. A seguir, ensaios de viabilidade celular foram realizados em outras linhagens de células para avaliar a toxicidade das nanocápsulas. As concentrações de 0.14 a 1.40 x 1011 de nanocápsulas/mL não afetaram significativamente a viabilidade celular de macrófagos murinos imortalizados (RAW 264.7) e U-937 após 24, 48 e 72 h de tratamento. Por fim, os macrófagos (RAW 264.7) foram incubados com 0.75 x 1011 MLNC-DHA-a1/mL durante 4 h e apresentam uma captação significativa das nanocápsulas, observada por microscopia hiperespectral de campo escuro (CytoViva®). Uma vez captadas pelos macrófagos murinos imortalizados (RAW 264.7), as nanoformulações MLNC-DHA-a1 promoveram um forte aumento da polarização do fenótipo M2 em comparação com as células controle não tratadas. Nossos resultados sugerem que o óleo de alga rico em DHA presente no núcleo lipídico das nanocápsulas, não reduziu a viabilidade celular e estimulou uma maior polarização de macrófagos para o tipo M2, sendo assim uma terapia potencial para controlar a inflamação crônica e cicatrizar ou estabilizar placas ateroscleróticas

Evaluación oxidativa, microbiológica, sensorial y perfil de ácidos grasos de un yogur con ácido docosahexaenoico (DHA) extraído de aceite de microalgas / Oxidative, sensory and fatty acid profile evaluation of a yogurt with docosahexaenoic acid (DHA) extracted from microalgae oil

RESUMEN Las necesidades de ácido docosahexaenoico (DHA), se incrementan en la mujer gestante para el desarrollo visual y neurológico del feto y el lactante. En este trabajo, se desarrolló y se evaluó un yogur adicionado con aceite de microalgas, que contribuyera a la recomendación dietaria de DHA en mujeres gestantes y lactantes. Se diseñaron tres formulaciones de yogur con 0,075; 0,125 y 0,175% de aceite de microalga y se compararon con una muestra control. Se evaluaron propiedades fisicoquímicas, sensoriales, microbiológicas, perfil de ácidos grasos, potencial antioxidante (ABTS, fenoles totales) y peroxidación lipídica (sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico [TBARS]). Los yogures adicionados con el aceite de microalga cubrieron en 30, 45 y 63% las recomendaciones de DHA para mujeres gestantes y lactantes por porción (200 mL). Se observó estabilidad del ácido graso, excepto en la muestra de mayor adición del aceite. La muestra con adición de 0,125% de aceite de microalga fue la de mejor calificación por el panel sensorial. Todas las muestras cumplieron con el estándar microbiológico y fisicoquímico para un yogur entero adicionado con dulce. Se observó potencial antioxidante promisorio en el yogur, capaz de proteger el DHA. Se concluye que las bebidas lácteas como el yogur son matrices adecuadas para la adición de aceite de microalga con la finalidad de aumentar el DHA en la dieta, especialmente en etapas en que las necesidades de este componente son más altas, como en periodo de gestación y lactancia.

ABSTRACT The needs for docosahexaenoic acid (DHA) are increased during pregnancy for the visual and neurological development of the fetus and the breastfed infant. In this study, a yogurt with microalgae oil added to contribute to the dietary recommendation of DHA in pregnant and breastfeeding women was developed and evaluated. Three yogurt formulations were designed with 0.075; 0.125 and 0.175 microalgae oil percentage and compared with a control sample. Fatty acid profile, antioxidant potential (ABTS, total phenols), lipid peroxidation (thiobarbitrical acid reactive substances [TBARS]), physicochemical, sensory, and microbiological properties were evaluated. Yogurts with microalgae oil added covered 30, 45 and 63% of DHA recommendations for pregnant and breastfeeding women per portion (200 mL). Fat acid stability was observed, except in the one with the greatest oil addition. The sample with 0.125% of microalgae oil added was rated the highest by the sensory panel. All samples met the microbiological and physicochemical standard for a whole yogurt added with sugar. Promising antioxidant potential capable of protecting DHA was observed in the yogurt. We conclude that dairy drinks such as yogurt are suitable matrices for adding microalgae oil in order to increase DHA in the diet, especially in stages where the needs of this component are higher as is the case during pregnancy and lactation periods.

Ácidos grasos en cepas de microalgas del Banco de Germoplasma de Organismos Acuáticos del Instituto del Mar del Perú (IMARPE)

Se determinó la composición de ácidos grasos de 54 cepas microalgales colectadas del Perú y mantenidas en el Banco de Germoplasma de Organismos Acuáticos (IMARPE) con la finalidad de determinar su uso nutricional en la acuicultura. Para ello se realizaron cultivos en un volumen de 50 mL y se determinaron los porcentajes relativos de ácidos grasos mediante transesterificación directa y cromatografía de gases. En el grupo Chlorophyta las microalgas que presentaron los mayores valores de porcentaje relativo de ácidos grasos fueron Chlamydomonas reinhardtii (16:0; 41.2%), Scenedesmus obtusus (18:1n-7; 33.6%), Acutodesmus dimorphus (18:1n-9; 37.1%), Desmodesmus armatus (18:3n-3; 32.2%) y Tetraselmis contracta (16:4n-3; 16.5%). En cambio en el grupo Bacillariophyta, los ácidos grasos más abundantes fueron 16:1n-7 en Chaetoceros didymus (20.2%), 18:4n-3 en Navicula sp. (28.3%) y EPA en Asterionellopsis sp. (31.5%). Por otro lado, en el grupo Dinophyta, todas las cepas superaron el 20% de DHA, en particular, la cepa de Akashiwo sanguinea presentó el mayor porcentaje relativo de este ácido graso (29.9%) y de los ácidos grasos 16:0 (24.8%) y EPA (16%). Se discute el uso de estas cepas según su contenido de ácidos grasos.

In This work, we determinate the fatty acids composition and their nutritional value in 54 microalgal strains, collected from Peru and stored in Banco de Germoplasma de Organismos Acuáticos (IMARPE). The cultures were grown to 50 mL and analyzed by direct transesterification and gas chromatography. In the Chlorophyta group, the microalgaes that present the highest relative percentage of fatty acids were Chlamydomonas reinhardtii (16:0; 41.2%), Scenedesmus obtusus (18:1n-7; 33.6%), Acutodesmus dimorphus (18:1n-9; 37.1%), Desmodesmus armatus (18:3n-3; 32.2%) and Tetraselmis contracta (16:4n-3; 16.5%). Moreover in the Bacillariophyta group, the most abundant fatty acids were 16:1n-7 in Chaetoceros didymus (20.2%), 18:4n-3 in Navicula sp. (28.3%) and EPA in Asterionellopsis sp. (31.5%). By the other hand, in the Dinophyta group, all strains exceed the 20% of DHA, in particular Akashiwo sanguinea, it was strain to have the highest percentage of this fatty acid (29.9%) in addition to 16: 0 (24.8%) and EPA (16%). We discussed uses of these strains is according to their fatty acids content.

Ômega 3 na gestação e seus benefícios / Omega 3 during pregnancy and its benefits

O objetivo desta pesquisa é levantar a literatura científica sobre os benefícios do Ômega-3 na gestação, que se deu pelas bases de dados Scientifc Electronic Library Online (Scielo), Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (Lilacs), Literatura Internacional em Ciências de Saúde (Medline) e National Library of Medicine (Pubmed) e Cochrane em literaturas nacionais e internacionais. Nesta pesquisa pode-se verificar que o ácido docosahexaenoico (DHA) é considerado como o principal tipo de Ômega-3 pelo fato de proporcionar benefícios para a saúde, que vão desde o desenvolvimento do cérebro e da retina do bebê, os quais têm início a partir da suplementação da mãe já na gestação. O acúmulo do Ômega-3 ocorre no último trimestre da gestação e o transporte se dá através da placenta, sendo depositado no cérebro e na retina do concepto. Ocorre também um acúmulo simultâneo nas glândulas mamárias durante esta fase. O recomendado pelo consenso é de 200mg/dia, independentemente da fonte utilizada para suplementação. O adequado aporte de Ômega-3 na gestação e no pós-natal tem influência positiva no desenvolvimento visual e do sistema nervoso do recém-nascido, influenciando também na inteligência e na intelectualidade do indivíduo na vida adulta. O Ômega-3 é importante também na prevenção e tratamento de diversas doenças como obesidade, doenças cardiovasculares, imunológicas, câncer de cólon, entre outras.(AU)

The objective of this research is to raise the scientific literature on the benefits of omega-3 during pregnancy, which occurred in research in databases Scientifc Electronic Library Online (Scielo), Latin American and Caribbean Health Sciences (Lilacs) , International Literature in Health Sciences (MEDLINE) and national Library of Medicine (PubMed) and the Cochrane in national and international literature, which can be seen that docosahexaenoic acid (DHA) is considered as the main type of Omega-3, the fact provide health benefits ranging from brain development and the baby's retina, which begins from the mother during pregnancy supplementation already. The Omega-3 accumulation occurs in the last trimester of pregnancy and the transport is through the placenta being deposited in the brain and retina of the fetus. It is also a simultaneous accumulation in the mammary glands during this phase. The recommended by consensus is 200 mg / day, regardless of the source used for supplementation. Adequate intake of omega-3 during pregnancy and in the postnatal has positive influences on visual development and the nervous system of the newborn, influencing also the intelligence and the individual intellect in adulthood. The Omega-3 is also important in the prevention and treatment of various diseases as obesity, cardiovascular, immune disorders, colon cancer, among others.(AU)

Efectos neuroprotectores del ácido araquidónico y del ácido docosahexaenoico en las etapas extremas de la vida: Una visión integradora / Neuroprotective effects of arachidonic and docosahexaenoic acid in the extreme stages of life: An integrative view

RESUMEN El estudio focalizado en dilucidar el rol neuroprotector del ARA y del DHA a lo largo del ciclo vital ha cobrado cada vez más interés puesto que se continúan descubriendo mecanismos mediante los cuales estos ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga (AGPICL) modulan el metabolismo. Tanto el ARA como el DHA se encuentran depositados en los lípidos de las membranas de las células que forman la materia gris y representan aproximadamente el 25% del contenido total de ácidos grasos cerebrales. El ARA y el DHA tienen efectos sobre el crecimiento y la diferenciación neuronal a través de la modulación de las propiedades físicas de la membrana, de la transducción de señales asociada a proteínas G y la modulación de la expresión génica, adquiriendo un rol relevante en la neuro-génesis y el desarrollo cerebral. Además, se les atribuye un rol neuroprotector en patologías neurodegenerativas como la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson, pudiendo disminuir la disfunción mitocondrial, la neuro-inflamación y el estrés oxidativo, expresiones características de estas patologías. La presente revisión analiza y discute acerca del rol del ARA y del DHA en la neuro-protección y en la neurodegeneración a través de una visión integradora.

ABSTRACT The study focused on elucidating the neuro-protective effects of ARA and DHA throughout the life cycle has become of increasingly interest since the continue discovering of mechanisms by which these long-chain polyunsaturated fatty acids (LCPUFA) modulate the metabolism. Both ARA and DHA are deposited into the membrane lipids of the cells that form the gray matter of the brain and represent approximately 25% of the total content of cerebral fatty acids. ARA and DHA have effects on the growth and neuronal differentiation through the modulation of the physical properties of the membrane, the signal transduction associated to G proteins and by the modulation of gene expression, acquiring a relevant role in neurogenesis and brain development. In addition, it is attributed to these fatty acids a neuro-protective role in neurodegenerative pathologies such as Alzheimer's disease and Parkinson's disease by decreasing the mitochondrial dysfunction, neuroinflammation and oxidative stress, characteristic of these pathologies. This review analyzes and discusses the role of ARA and DHA in neuro-protection and neuro-degeneration through an integrative vision.

Suplementos nutricionales en el deterioro cognitivo y la enfermedad de Alzheimer: revisión de la literatura / Dietary supplements in cognitive impairment and Alzheimer's disease: a literature review

RESUMEN OBJETIVOS: Evaluar los efectos del consumo de ácidos grasos omega 3 en forma de suplementos, complementos o alimentos sobre la función cognitiva de los adultos. MÉTODOS: Se realizó una revisión de la literatura en las bases de datos Medline y Embase, buscando ensayos clínicos, estudios observacionales, revisiones sistemáticas y estudios experimentales que relacionaran los ácidos grasos omega 3 con función cognitiva y Alzheimer. RESULTADOS: La mayoría de los estudios relacionó la suplementación de cápsulas con omega 3, el consumo de pescado u otros alimentos con contenido de omega 3, con resultados en pruebas de función cognitiva, desenlace de enfermedad o imágenes diagnósticas, encontrando en general efectos benéficos, que parecen ser mayores en personas sanas y con mejor función cognitiva de base. Hubo diferencias en los resultados encontrados en los ensayos clínicos y revisiones sistemáticas, que podrían atribuirse a la variabilidad en las dosis de la suplementación, el tiempo de seguimiento y la manera en que se midió la función y el deterioro cognitivo. CONCLUSIÓN: El consumo de ácidos grasos omega 3 en forma de suplementos, complementos o alimentos ricos en estos como el pescado parece tener efectos benéficos en la función cognitiva de las personas adultas.

SUMMARY OBJECTIVES: To evaluate the effects of omega 3 fatty acids consumption in the form of dietary supplement, complement or food-products presentation on adult cognitive function. METHODS: A literature review in two databases (Medline and Embase) was undertaken, searching for clinical trials, observational studies, systematic reviews and experimental studies concerning omega-3 fatty acids and their relation with cognitive function and Alzheimer's disease. RESULTS: Most studies linked supplementation with omega-3 capsules and consumption of fish and other omega-3 containing foods with results in cognitive function testing, outcomes in diseases or diagnostic imaging and found beneficial effects, which seem to be stronger in healthier persons with better cognitive function at baseline. There were differences in the results found in clinical trials and systematic reviews, which could be attributable to the variability in the supplementation dose, the length of follow-up and the methods used to assess cognitive function and decline. CONCLUSION: The use of omega-3 fatty acids in supplement, complement or food-products presentation seems to have beneficial effects in the cognitive function of healthy adults.

Ácidos graxos poli-insaturados ômega-3 e lúpus eritematoso sistêmico: o que sabemos? / Polyunsaturated omega-3 fatty acids and systemic lupus erythematosus: what do we know?

Diversos estudos têm demonstrado a habilidade dos ácidos graxos ômega-3 em reduzir asconcentrações de proteína C-reativa (PCR), eicosanoides pró-inflamatórios, citocinas, quimiocinas e de outros biomarcadores da inflamação. Por essas propriedades, a suplementação com essa classe de lipídeos pode representar terapia adicional ao tratamento de doençasinflamatórias crônicas sistêmicas, como o lúpus eritematoso sistêmico (LES) e outrasdoenças reumáticas. O papel dessa classe de lipídeos no LES ainda não está bem estabelecido. No entanto, parece haver relação entre o consumo deste tipo de gordura e a diminuiçãodas manifestações e da atividade inflamatória da doença. Sendo assim, este artigo apresentarevisão da literatura científica sobre os efeitos dos ácidos graxos ômega-3 em pacientescom LES. Realizou-se levantamento bibliográfico junto aos bancos de dados Medical Literature Analysis and Retrieval System Online (MEDLINE) e Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS), utizando-se como palavras-chave: lúpus eritematoso sistêmico (LES), ácidos graxos poli-insaturados ômega-3, ácido eicosapentaenoico(EPA), ácido docosahexaenoico (DHA), antioxidantes e dieta. Foram incluídos artigos publicados até setembro de 2013. Quarenta e três artigos relacionados ao tema foram encontrados. Após limitar a busca apenas para estudos realizados em seres humanos foram encontrados 15 artigos, sendo três de revisão e 12 ensaios clínicos.

Various studies have demonstrated the impact of omega-3 fatty acids on the concentration of C reactive protein (CRP), pro-inflammatory eicosanoids, cytokines, chemokines and other inflammatory mediators. Therefore, the supplementation of these types of lipids may represent additional option treatment for chronic systemic diseases, such as Systemic Lupus Erythematous and other rheumatic diseases. The role of these lipids has not been well established, yet. However, it seems there is a direct relationship between its intake and the decrease of the disease clinical manifestations as well as of the inflammatory status of the patients. Thus, the aim of this manuscript is to present a thorough review on the effects of omega-3 fatty acids in patients with SLE. Bibliographic data set as the Medical Literature Analysis and Retrieval System Online (MEDLINE) and Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS) were searched using as key words: systemic lupus erythematous (SLE), polyunsaturated fatty acids omega-3, eicosapentanoic acid (EPA), docosahexanoic acid (DHA), antioxidants and diet. Manuscripts published up to September 2013 were included. There were 43 articles related to the topic, however only 15 pertained human studies, with three review articles and 12 clinical studies.

Ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga ω-3 y enfermedad cardiovascular / N-3 long chain polyunsaturated fatty acids and cardiovascular disease

ω-3 Long-chain polyunsaturated fatty acids (ω-3 LCPUFA) of marine origin, such as eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA) present in fatty fish or blue fish, have different beneficial effects on human health especially at the cardiovascular level. From the late observations in the 1960s, basic, clinic and epidemiological evidence have established significant cardio protective effects for these fatty acids in reducing the morbidity and mortality from the disease. The cardiovascular benefits of ω-3 LCPUFA of marine origin are targeted on various inflammatory and metabolic pathways which are regulated by these fatty acids, particularly in the vascular endothelium, the inflammatory response and cardiac cells activity. EPA and DHA are transformed into a variety of eicosanoids and docosanoids which have strong anti-inflammatory actions antagonizing the proinflammatory actions of ω-6 LCPUFA. The different molecular mechanisms by which these fatty acids exert cardio protective effects and the clinical and epidemiological evidence demonstrating the reduction in the morbidity and mortality from cardiovascular diseases are discussed.

Los ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga ω-3 (AGPICL ω-3) de origen marino, principalmente el ácido eicosapentaenoico (EPA) y el ácido docosahexaenoico (DHA), presentes especialmente en pescados grasos o azules, producen diversos efectos saludables en la salud humana, especialmente a nivel cardiovascular. Desde la década de 1960 han surgido múltiples evidencias básico-clínicas y epidemiológicas que establecen que estos ácidos grasos ejercen un significativo efecto cardioprotector, produciendo una disminución de la morbilidad y de la mortalidad por enfermedad cardiovascular. El EPA y el DHA son transformados eicosanoides y docosanoides que tienen poderosos efectos antiinflamatorios y que antagonizan el efecto proinflamatorio de AGPICL ω-6. Los beneficios a nivel cardiovascular atribuidos a los AGPICL ω-3 de origen marino se centran, principalmente, en la regulación de vías metabólicas de la respuesta inflamatoria en el endotelio vascular y en la actividad de las células cardíacas. Esta revisión discute las diferentes evidencias metabólicas, clínicas y epidemiológicas que demuestran como el consumo de AGPICL ω-3 de origen marino puede reducir la morbilidad y mortalidad por enfermedad cardiovascular.

Estudos dos produtos da oxidação não enzimática do ácido docosahexaenoico como possíveis biomarcadores para doenças neurodegenerativas / Study of Docosahexaenoic acid non-enzymatic oxidation products as biomarkers for neurodegenerative diseases

Os n-3 e n-6 são duas famílias de ácidos graxos poli-insaturados. Os ácidos graxos de cadeia longa como o ácido araquidônico (AA) e docosahexaenoico (DHA) apresentam importantes funções no desenvolvimento e funcionamento do cérebro. Os produtos de oxidação dos ácidos graxos poli-insaturados estão presentes ou aumentados ao longo do desenvolvimento de doenças neurodegenerativas. A caracterização de tais produtos é crítica para o estudo que busca entender o seu papel fisiopatológico no desenvolvimento de tais doenças. No presente trabalho, buscou-se o desenvolvimento de uma ferramenta analítica sensível e específica para a detecção e quantificação dos hidroperóxidos e hidróxidos do AA (HpETE e HETE), do seu precursor, o ácido linoleico (HpODE e HODE) e do DHA (HpDoHE e HDoHE). Estes hidroperóxidos foram sintetizados por fotooxidação e os hidróxidos correspondentes foram obtidos através da redução com o NaBH4. Os isômeros isolados foram caracterizados por LC-MS/MS. Os íons produto específicos de cada isômero foram escolhidos para a construção do método de monitoramento de reação selecionada (selected reaction monitoring - SRM) para a realização da análise quantitativa dos analitos de interesse. Cabe salientar que os dados obtidos poderão ser utilizados em bibliotecas de análise lipidômica e oxi-lipidômica pois serão essenciais para a identificação e quantificação dos analítos de interesse do presente estudo em diversas doenças. Utilizando o método padronizado, buscamos investigar o papel dos hidroperóxidos e hidróxidos do DHA, LA e AA em um modelo animal para a esclerose lateral amiotrófica (ELA), uma doença neurodegenerativa que acomete neurônios motores. Foi observado um aumento nos níveis de 13-HpODE, 9-HpODE e 12-HETE no córtex motor dos animais avaliados. Adicionalmente, foram observadas alterações nas taxas lipólica e lipogênica no tecido adiposo para os animais ELA em relação aos respectivos controles. Em conjunto, os dados apresentados no presente trabalho corroboram com os trabalhos da literatura que associam alteração dos níveis dos produtos de oxidação dos ácidos graxos poli-insaturados em doenças neurodegenerativas e o metabolismo energético alterado em ELA. Futuramente é necessária uma investigação mais ampla dos níveis dos hidroperóxidos e hidróxidos lipídicos em diferentes tecidos e do metabolismo lipídico, e os conhecimentos gerados poderão ser uma importante fonte de novas opções terapêuticas para os pacientes portadores de ELA

The n-3 and n-6 are two olyunsaturated fatty acids families. The long chain fatty acids such as arachidonic (AA) and docosahexaenoic acid (DHA) have important roles in the development and function of the brain. Polyunsaturated fatty acids (PUFAs) oxidation products are present or increased during the progression of neurodegenerative diseases. The characterization of DHA oxidation products is critical to understand their roles in the development of such diseases. In the present study, we sought to develop a sensitive and specific analytical tool for the detection and quantification of AA hydroperoxides and hydroxides (HPETE and HETE), its precursor linoleic acid (HPODE and HODE) and DHA (HpDoHE and HDoHE). These hydroperoxides were synthesized by photooxidation and the corresponding hydroxides were obtained by reduction with NaBH4. The isolated isomers were characterized by LC-MS/MS, and unique and specific fragment ions were chosen to construct a selected reaction monitoring (SRM) method for the targeted quantitative analysis. It should be emphasized that the data obtained - in the form of lipidomics and oxy-lipidomics libraries - may be used to assist in several diseases. Using the standardized method, we investigated the role of hydroperoxides and hydroxides of DHA, LA and AA in an animal model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS), a neurodegenerative disease that affects motor neurons. Increased levels of 13-HPODE, 9-HPODE and 12-HETE were observed in the animals motor cortex. Additionally, results show changes in lipogenic and lipolytic rates in adipose tissue for ALS animals when compared to their respective controls. Altogether, the data presented herein corroborate with the literature by linking altered levels of PUFAs oxidation products in neurodegenerative diseases with altered energetic metabolism in ALS. In the future, a more extensive investigation of the hydroperoxide and hydroxide level in different tissues as well as the lipid metabolism must be done, which could lead to new therapeutic options for ALS patients

Perfil de incorporação de ácidos graxos em membranas de eritrócitos de recém-nascidos prematuros recebendo nutrição parenteral com diferentes emulsões lipídicas / Profile of fatty acids incorporation in erythrocyte membrane of premature newborns who received parenteral nutrition with different lipid emulsions

Introdução: Devido a diversos fatores, recém-nascidos prematuros, em sua maioria, necessitam de nutrição parenteral e uma fonte lipídica que possua um equilíbrio entre os variados tipos de ácidos graxos. SMOFlipid® 20%, uma nova emulsão lipídica pode ser mais adequada para esse equilíbrio. Objetivo: Avaliar o perfil de incorporação de ácidos graxos em eritrócitos de prematuros recebendo essa nova emulsão lipídica, comparada com outra emulsão baseada em óleo de soja. Métodos: Em um ensaio clinico controlado randomizado duplo cego avaliou-se 47 recém-nascidos pré-termo que receberam nutrição parenteral SMOFlipid® 20% (n=25) ou LIPOVENOS® MCT 20% (n=22). Foram avaliados parâmetros laboratoriais, clínicos, demográficos e o perfil de incorporação de ácidos graxos na membrana de eritrócitos. Resultados: Os parâmetros clínicos e demográficos como peso, perímetro cefálico, comprimento, idade gestacional e índice de Apgar não diferiram entre os grupos. Os valores de triglicerídeos e da lipoproteína de muito baixa densidade (VLDL) foram estatisticamente maiores no grupo SMOFLIPID® 20%. Níveis de Aspartato aminotransferase (AST) foram menores em ambos os grupos e os níveis de bilirrubina total e frações não tiveram diferenças. A emulsão SMOFlipid® 20% aumentou os níveis dos ácidos docosa-hexaenoico DHA (C 22:6 w3) e Eicosapentaenoico EPA (C 20:5 w3) na membrana dos eritrócitos. Conclusões: Neste grupo de recém-nascidos pré-termos, essa nova emulsão lipídica, além de mostrar segurança, contribuiu para uma mudança benéfica no perfil de incorporação de ácidos graxos nas membranas celulares, principalmente DHA e EPA.

Introduction: Due to several factors, premature newborn infants, in most cases, require parenteral nutrition and a lipid source with balance among the different types of fatty acids. SMOFlipid® 20%, a new lipid emulsion may be more appropriate for this balance. Objectives: To evaluate the profile of fatty acids incorporation in erythrocytes of premature newborn infants receiving this new lipid emulsion compared with an emulsion based on soybean oil. Methods: In a randomized, controlled, double-blind clinical trial, 47 preterm newborn who received parenteral nutrition SMOFlipid® 20% (n=25) or Lipovenos MCT® 20% (n=22) were evaluated. Laboratorial, clinical and demographic parameters and the profile of incorporation of fatty acids in the erythrocyte membrane were evaluated. Results: The clinical and demographic parameters such as weight, head circumference, length, gestational age, and Apgar scores did not differ between the groups. The values of triglycerides and lipoprotein of very low density (VLDL) were statistically higher in the SMOFlipid® 20% group. Levels of aspartate aminotransferase (AST) were lower in both groups and levels of total bilirubin and fractions had no differences. The SMOFlipid® 20% emulsion increased the levels of the docosahexaenoic acid (DHA) and eicosapentaenoic (EPA) acid in the erythrocytes membrane. Conclusions: In this group of preterm newborn infants, this new lipid emulsion, besides showing security, contributed to a beneficial change in the incorporation profile of fatty acids cell membranes, especially DHA and EPA.

Ácido docosahexaenoico (DHA), un ácido graso esencial a nivel cerebral / Docosahexaenoic acid (DHA), an essential fatty acid at the brain

Docosahexaenoic acid (C22: 6 -3, DHA) is a long-chain polyun-saturated fatty acid of marine origin essential for the formation and function of the nervous system, particularly the brain and the retina of humans. It has been proposed a remarkable role of DHA during the human evolution, mainly on the growth and development of the brain, effect that allowed the emergence of the first cognitive skills that differentiated our specie from other animals. Currently, DHA is considered a critical nutrient during pregnancy and breastfeeding due to it active participation at both, the structural and functional development of the nervous system in early life. DHA and specifically one of its derivatives known as neuroprotectin D-1 (NPD-1), has neuroprotective properties against brain aging, neurodegenerative diseases and injury caused by the damage generated during brain ischemia-reperfusion episodes. This paper reviews and discusses the importance of DHA in the human brain given the importance of this fatty acid in the development of the tissue and as neuroprotective agent. It also includes a critical view about the use of this noble fatty acid in the population.

El ácido docosahexaenoico (C22:6 ω-3, DHA) es un ácido graso poliinsaturado de cadena larga de origen marino fundamental para la formación y funcionalidad del sistema nervioso, especialmente para el cerebro y la retina de los humanos. Es destacable el rol trascendental que se propone tuvo este ácido graso en la evolución humana, principalmente en el crecimiento y desarrollo cerebral, efecto que permitió el surgimiento de las primeras habilidades cognitivas y de inteligencia que diferenciaron a nuestra especie de otros animales. Actualmente se considera al DHA como un nutriente crítico durante el embarazo y la lactancia debido a su activa participación en el desarrollo del sistema nervioso tanto a nivel estructural como funcional en los primeros años de vida. DHA y específicamente uno de sus derivados conocidos como neuroprotectina D-1 (NPD-1), presenta propiedades neuroprotectoras frente al envejecimiento cerebral, algunas enfermedades neurodegenerativas y a la injuria causada por el daño durante episodios de isquemia-reperfusión cerebral. En este trabajo se revisa y discute la relevancia del DHA a nivel cerebral, considerando la importancia de este ácido graso tanto en el desarrollo cerebral como en los efectos neuroprotectores que presenta. Se incluye, además, una visión crítica sobre el consumo de este noble ácido graso en la población.

Prevention of liver steatosis through fish oil supplementation: correlation of oxidative stress with insulin resistance and liver fatty acid content / Prevención de la esteatosis hepática mediante suplementación con aceite de pescado: correlación de los niveles hepáticos de ácidos grasos poliinsaturados con el estrés oxidativo y la resistencia a la insulina

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is triggered by a nutritional-metabolic alteration characterized by triacylglicerides acumulation, insulin resistance (IR), oxidative stress and depletion of polyunsaturated fatty acid (PUFA). The n-3 PUFA, such as eicosapentaenoic (EPA) and docosahexaenoic (DHA) acids, would be hepatoprotective against the development of NAFLD by stimulating lipolysis and inhibit lipogenesis. So, fish oil supplementation (EPA + DHA) prevents HFDinduced NAFLD. In this context, the aim of this study is to evaluate the correlation between liver oxidative stress with IR and levels of PUFA in supplemented mice. Male mice C57BL/6J (n=9) were fed for 12th week: a) control diet (20% protein, 70% carbohydrate, 10% lipids), b) control diet and fish oil supplementation (200 mg EPA+DHA/kg/day), c) high fat diet (20% protein, 20% carbohydrate, 60% lipids), and d) high fat diet and fish oil supplementation. Liver steatosis (histology), insulin resistance (HOMA), liver oxidative stress (GSH/GSSG, carbonyl protein and 8-isoprostanes) and liver fatty acid content were evaluated. The significant decrease in liver oxidative stress parameters (p<0.05, ANOVA followed by Newman Keuls test) were correlated (Pearson test) with HOMA and levels of PUFA, along with the hepatoprotection observed. It concludes that prevention of NAFLD by supplementation with fish oil (EPA+DHA) is dependent of the prevention of liver oxidative stress, IR and PUFA depletion.

La enfermedad por hígado graso no alcohólica (EHGNA) está provocada por una alteración metabólico- nutricional caracterizada por la acumulación de triacilglicéridos, resistencia a la insulina, estrés oxidativo y disminución de ácidos grasos poliinsaturados (AGPI). Los AGPI ω-3, como los ácidos eicosapentaenoico (EPA) y docosahexaenoico (DHA), serían hepatoprotectores contra la EHGNA al estimular la lipolisis e inhibir la lipogénesis hepática. La suplementación con aceite de pescado (EPA + DHA) previene la esteatosis hepática inducida por una dieta alta en grasas. En este contexto, el objetivo de este estudio es evaluar la correlación entre el estrés oxidativo hepático, la resistencia a la insulina y los niveles de AGPI ω-3 en ratones suplementados. Ratones machos C57BL/6J (n=9) alimentados durante 12 semanas con: a) dieta control (20% proteína, 70% hidratos de carbono, 10% lípidos), b) dieta control y suplementación con 200 mg de EPA+DHA/kg/día, c) dieta alta en grasa (20% proteína, 20% hidratos de carbono, 60% lípidos), y d) dieta alta en grasas más EPA+DHA. Se evaluaron la esteatosis hepática (histología), resistencia a la insulina (HOMA), estrés oxidativo hepático (GSH/GSSG, proteínas carboniladas y 8-isoprostanos) y el contenido de ácidos grasos hepáticos. La disminución significativa en los parámetros hepáticos de estrés oxidativo (p <0,05, ANOVA seguido de Newman-Keuls) se correlacionó positivamente (test de Pearson) con el HOMA y los niveles de AGPI ω-3, junto con la hepatoprotección observada. Se concluye que la prevención de EHGNA por suplementación con EPA+DHA, se acompaña de una correlación inversa entre el estrés oxidativo y la resistencia a la insulina y la disminución de AGPI ω-3 hepáticos.

Avaliação do efeito do ácido docosahexaenoico e de seus hidroperóxidos na oligomerização de SOD1 em um modelo da doença esclerose lateral amiotrófica / Evaluation of the effect of docosahexaenoic acid and its hydroperoxides in oligomerization of SOD1 in a model of the disease amyotrophic lateral sclerosis

A Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA) é uma doença progressiva e fatal causada pela degeneração seletiva dos neurônios motores do cérebro e medula. Dos casos familiares de ELA (fELA), 20% são causados por mutações pontuais no gene da sod1. O ácido docosahexaenoico (C22:6, n-3, DHA) é um ácido graxo altamente insaturado, sendo um dos principais ácidos graxos da massa cinzenta do cérebro. Estudos têm correlacionado mutações de SOD1 com a formação de agregados que poderiam ser induzidos por ácidos graxos insaturados. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos e mecanismos do DHA e de seus hidroperóxidos (DHAOOH) na agregação de SOD1 in vitro. As análises de dicroísmo circular (CD) mostraram mudanças na estrutura secundária de ambas as proteínas apo-SOD1WT e G93A promovidas pelo DHA, resultando em aumento de superfície hidrofóbica e formação de estruturas do tipo beta-amilóide, como mostrado pelos ensaios do bis- ANS e Tioflavina, respectivamente. Estas mudanças resultam na formação de agregados amorfos como observado por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Espécies de alto peso molecular foram observadas nas incubações do DHA com as formas apo da SOD1 por SDS-PAGE sob condições não redutoras e também por cromatografia de exclusão por tamanho. A formação dos agregados mostrou-se dependente de resíduos de Cys na sua forma desprotonada, visto que agregados não foram observados na presença de beta-mercaptoetanol e sua formação foi inibida na presença de bloqueador de tióis e em pH ácido. Além disso, análises por cromatografia de exclusão mostraram que a agregação é dependente da insaturação e conformação cis dos ácidos graxos. Comparativamente ao DHA, os hidroperóxidos do DHA tiveram um efeito menor na agregação de SOD1, porém revelaram a propriedade de induzir a dimerização covalente de SOD1. No geral, os dados mostram que o DHA induz a agregação de SOD1, através de um processo envolvendo a exposição de superfícies hidrofóbicas, formação de pontes dissulfeto e também de possíveis cross-links envolvendo reações do tipo "ene-tiol"

ALS is a progressive and fatal disease caused by selective degeneration of motor neurons in the brain and spinal cord. Twenty percent of familial ALS (fALS) cases are caused mainly by point mutations in the sod1 gene. Docosahexaenoic acid (C22:6, n-3, DHA) is a highly unsaturated fatty acid, wich is one of the main fatty acids in the cerebral gray matter. Studies have linked SOD1 mutations to the formation of aggregates that could be induced by unsaturated fatty acids. The aim of this study was to evaluate the effect of DHA on aggregation of SOD1 fALS mutants in vitro and its mechanisms. CD analysis shows changes in the secondary structure of both apo-SOD1WT and G93A promoted by DHA resulting in an increase in the surface hydrophobicity and formation of structures such as beta amyloid, which was also confirmed by bis-ANS assay and Thioflavin, respectively. These changes enhance the interaction of SOD1 and DHA, leading to amorphous aggregates as revealed by FESEM. Incubation of DHA with apo-SOD1 forms results in high-molecular weight species as detected by SDS-PAGE analyses under non-reducing conditions and also by size exclusion chromatography. This appears to require Cys residues in their thiolate forms because high aggregates are not observed under reducing conditions and also by size exclusion chromatography or at acidic pH. Also, size-exclusion chromatography indicates that the mutant apo-SOD1 aggregation is dependent on the unsaturation and cis-conformation of fatty acids. Compared to the DHA, DHAOOH had a minor effect on SOD1 aggregation, however revealed the ability to induce covalent dimerization of SOD1. Overall, the data suggest a mechanism of DHA aggregation, by a process involving exposure to hydrophobic surfaces, formation of disulfide bonds and also for possible cross-links involving reactions such "thiol-ene"

Ácido docosahexaenoico y ácido araquidónico en neonatos: ¿el aporte que reciben es suficiente para cubrir sus necesidades? / Docosahexaenoic acid in neonates: do they receive enough to reach their needs?

Se describen las bases fisiológicas de la acción de los ácidos grasos poliinsaturados de las familias n-6 y n-3, así como de sus productos finales: el ácido araquidónico y el ácido docosahexaenoico, respectivamente, para identificar su importancia durante la etapa fetal en las funciones estructurales críticas al llegar a las 40 semanas de gestación. El déficit de los ácidos grasos poliinsaturados se relaciona con patologías en los niños pretérmino que no lograron la acreción adecuada, como la retinopatía del prematuro, la enterocolitis necrosante o la displasia broncopulmonar, entre otras. Se analizan los trabajos que evalúan el efecto del suplemento con diferentes concentraciones de ácidos grasos poliinsaturados sobre funciones neurológicas y visuales y crecimiento en los recién nacidos. Se abordan las necesidades de ácido docosahexaenoico y ácido araquidónico en esta etapa de la vida, y se comparan con el aporte que se puede lograr mediante la alimentación con leche humana y con las diferentes fórmulas para recién nacidos pretérmino, término y lactantes. Dado que el niño pretérmino nace con deficiencias tisulares pero con requerimientos aumentados de estos ácidos grasos, parece ser insuficiente el aporte con las fórmulas suplementadas comerciales actuales. La recomendación final es la alimentación de los niños con leche humana, ofreciendo a la madre sugerencias de consumo de fuentes con alto contenido de ácido docosahexaenoico, sobre todo si su hijo fue pretérmino.

In this article we discuss the physiological bases of polyunsaturated fatty acids (PUFAs) from n-6 and n-3 families and their end products: arachidonic acid (AA) and docosahexaenoic acid (DHA), respectively, to identify their importance in the fetal stage such as critical structural functions at 40 weeks of gestation. PUFA deficit is related to pathologies in preterm infants who did not achieve adequate accretion such as retinopathy of prematurity (ROP), necrotizing enterocolitis (NEC), and bronchopulmonary dysplasia (BPD), among others. In addition, studies evaluating the effect of supplementation with different concentrations of PUFAs on neurological and visual function and growth in neonates are analyzed. We also address the needs of DHA and AA at this stage of life and compare the enteral intake achieved by human milk feeding and the different formulas for preterm and term infants. DHA concentration in breast milk is highly variable and its contribution may be insufficient in neonates. Preterm infant formulas can meet international recommendations of DHA and AA issued by different organizations but, due to preterm birth, these infants have scarce tissue reserves but increased requirements for these fatty acids. Thus, enteral intake using current supplemental formula feeding appears to be insufficient. The final recommendation is to feed neonates with human milk by offering information to mothers regarding food sources with high DHA content, especially in the case of preterm babies.

Trabajos de Investigación Increase of plasma fatty acids without changes in n-6/n-3-PUFA ratio in asymptomatic obese subjects / Aumento de las concentraciones plasmáticas de ácidos grasos sin cambio en el ratio de n-6/n-3 PUFA en sujetos obesos asintomáticos

Obesity is associated with a low grade inflammation which contributes to the development of insulin resistance and diabetes. The aim of this study was to assess the total saturated (SFAs), monounsaturated (MUFAs) and polyunsaturated fatty acids (PUFAs) in plasma from asymptomatic obese subjects and to determine the arachidonic/eicosapentanoic acid ratio [ARA/EPA] as a marker of inflammation, and its eventual association with ultrasensitive CRP. Fourteen obese (34.4 ± 11.1y.; BMI: 36.0 ± 4,5 kg/m2) and 12 normal-weight (30.6 ± 7.8y.; BMI: 23,6± 2,4 kg/m2) subjects were recruited and their plasma fatty acids were determined by gas chromatography. usCRP was higher in the obese subjects (p=0,01) and correlates with their body fat content. The percentages of SFAs, MUFAs, PUFAs were not affected in the obese subjects but their concentrations were increased, compared with the control group. However, no differences in the long chain PUFAs (DHA and EPA) concentrations or in the plasmatic ARA/EPA ratio were observed in these subjects. These observations do not support a relation between the ARA/EPA ratio and the presence of low grade inflammation evaluated by plasma usCRP in this group of asymptomatic obese subjects.

La obesidad está asociada con una inflamación de bajo grado que contribuye al desarrollo de la insulino-resistencia y de la diabetes. El objetivo de este estudio fue evaluar las concentraciones plasmáticas de ácidos grasos saturados (AGS), monoinsaturados (AGMI) y poliinsaturados (AGPI) en sujetos obesos asintomáticos y determinar el ratio ácido araquidónico/ácido eicosapentanoico [ARA/EPA] como un posible marcador de inflamación, con su eventual asociación con los niveles de proteína C reactiva ultrasensible (PCRus). Se reclutaron 14 sujetos obesos (34,4 ± 11.1 años; índice de masa corporal: 36,0 ± 4,5 kg/m2) y 12 normopeso (30,6 ± 7.8 años; índice de masa corporal: 23,6 ± 2,4 kg/m2); las concentraciones plasmáticas de ácidos grasos fueron determinados por cromatografía de gases. Los niveles de PCRus fueron más elevadas en los sujetos obesos (p=0,01) y correlacionaron con el contenido de grasa corporal. Los porcentajes relativos de AGS, AGMI, AGPI no se vieron afectados en los sujetos obesos, pero sus concentraciones plasmáticas se incrementaron en comparación con el grupo control. Sin embargo, no se observaron diferencias en las concentraciones de PUFAs de cadena larga (DHA, EPA y ARA) ni en el ratio ARA/EPA en los sujetos obesos. Estas observaciones no apoyan el uso del ratio ARA/EPA como un marcador de inflamación de bajo grado evaluada por PCRus en este grupo de sujetos obesos asintomáticos.

Aporte de ácidos grasos trans, ácido linoleico conjugado y ácido docosahexaenoico, en la grasa de leche materna de nodrizas chilenas / Trans fatty acids, conjugated linoleic acid and docosahexaenoic acid, in the fat of breast milk of lactating Chilean mothers

Introduction: Breast milk has several compounds obtained from food sources, such as conjugated linoleic acid (CLA). Objective: To compare the amount of trans fatty acids (TFA), CLA and docosahexaenoic acid (DHA) in the fat of breast milk with reported food consumption. Subjects and method: Descriptive study of 10 lactating Chilean women. Breast milk fatty acids were analyzed by gas liquid chrornatography and results compared to data obtained from a food frequency questionnaire. Results: Forty-two fatty acids were quantified, TFA (3.6 percent), CLA (0.8 percent), and DHA (0.2 percent). Of the 42 fatty acids, 4 CLA isomers and 3 TFA isomers were identified. The consumption offish, milk and meat was low. A positive correlation (p<0.05) between diet and the amount of two fatty acids, linolenic acid (LNA) and DHA, was found in breast milk fat. Conclusions: The amount of CLA and DHA found in food consumed and breast milk had a significant correlation; however, the amount of TFA is similar to that reported in other international studies.

Introducción: La leche materna posee una serie de componentes, entre ellos el ácido docosahexaenoico (DHA) y el acido linoleico conjugado (CLA), siendo la dieta el principal aportador. Objetivo: Comparar el contenido de CLA, trans industriales (AGT) y DHA de leche materna con la ingesta alimentaria. Sujetos y método: Estudio descriptivo de 10 nodrizas, se obtuvo una muestra de leche materna, la materia grasa se analizó por cromatografía de gas-líquido, el resultado se comparó con una encuesta alimentaria. Resultados: Se cuantificaron 42 ácidos grasos, trans industriales (3,6 por ciento), el CLA (0,8 por ciento) y DHA (0,2 por ciento) del total de ácidos grasos de la grasa. Se cuantificaron 4 isómeros de CLA y 3 ácidos grasos trans industriales. El consumo de alimentos marinos, lácteos y carnes fue bajo. Al correlacionar la dieta y presencia de ácidos grasos, el ácido linoleico (AL) y el DHA mostraron una correlación positiva (p<0,05). Conclusión: Tanto la ingesta como la presencia de DHA y CLA en leche materna es baja, en cambio la presencia de trans industrial es moderada con respecto a otros estudios.

Propriedades antioxidantes em subproduto do pedúnculo de caju (Anacardium occidentale L. ): efeito sobre a lipoperoxidação e o perfil de ácidos graxos poliinsaturados em ratos / Antioxidant properties in cashew apple byproduct (Anacardium occidentale L. ): effect on lipoperoxidation and on the polyunsaturated fatty acids profile in rats

O caju (Anacardium occidentale L.) apresenta substâncias fenólicas, as quais são atribuídas propriedades antioxidantes. Sendo assim, o presente trabalho objetivou verificar a capacidade antioxidante em subproduto, ou seja, no bagaço do pedúnculo do caju. O potencial antioxidante do extrato hidroalcoólico (EHAlc) do bagaço do pedúnculo de caju foi avaliado em sistema de varredura do radical 2,2'-difenil-1-picrilhidrazilo (DPPHò) e em ensaio in vivo. No sistema DPPH, o extrato demonstrou atividade antioxidante de cerca de 95% em sua maior concentração (1000 µg/mL). Para o estudo in vivo, foram utilizados ratos Wistar administrando oralmente EHAlc (200 e 400 mg/kg de peso corpóreo) por 30 dias e analisados os tecidos plasmático, hepático e cerebral. Não houve alterações na peroxidação lipídica no plasma e no fígado dos animais tratados comparados ao grupo controle. Contudo, foi observada redução da lipoperoxidação no cérebro dos grupos tratados. Além do mais, neste tecido, os animais tratados apresentaram maior quantidade de ácidos graxos poliinsaturados (AGPI), destacando-se o ácido docosahexaenóico (DHA). Estes resultados indicam que o EHAlc contém antioxidantes naturais efetivos e que podem contribuir na redução da lipoperoxidação e preservação dos AGPICL no tecido cerebral de ratos, dando indícios da capacidade antioxidante do bagaço do pedúnculo de caju CCP-76.

The cashew apple (Anacardium occidentale L.) contains phenolic compounds usually related with antioxidant properties. Then, the aim of this study was to investigate its antioxidant capacity. The antioxidant capacity of the hydroalcoholic extract of the cashew apple pulp (EHAlc.) was assessed for the scavenging of the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical (DPPH) by in vitro method and by an in vivo essay. For this essay a 30-day oral (gavage, EHAlc. 200 and 400 mg/kg) study was conducted in Wistar male rats, evaluating hepatic, plasma and brain tissues. In DPPH model, the extract demonstrated antioxidant activity of 95% (largest concentration, 1000 µg/ mL). There were found no relevant peroxidation comparing the treated animals with the control group. However, the treated group presented a lower level of brain lipoperoxidation. Also in the treated animals brain tissue was found the largest amount of polyunsaturated fatty acids (PUFA), mainly docosahexaenoic (DHA). Therefore, the analyzed extract from cashew apple pulp clone CCP-76 contains effective natural antioxidants, responsible for free radical scavenging in vitro and also for decreasing the brain lipoperoxidation and keeping the PUFAS levels in Wistar rats.

Isolation of syringaldehyde from Mikania laevigata medicinal extract and its influence on the fatty acid profile of mice / Extrato medicinal de Mikania laevigata: influência no perfil de ácidos graxos em camundongos e isolamento de siringaldeído por CLAE semipreparativa

The Mikania genus is widely known as "guaco" and is used to treat fever, rheumatism, flu and respiratory diseases. Our previous work evidenced the synergism among M. laevigata extract components to produce desirable effects, and included the coumarin precursor, o-coumaric acid as marker. Many Mikania species are producers of ent-kaurene diterpenes which presented antiespasmodic and relaxant activities on smooth muscle. Seeking to standardize the guaco extract, which is registered in the Brazilian Pharmacopoea, this paper deals with the determination of kaurenoic acid through LC-PDA and the isolation through LC of syringaldehyde. Kaurenoic acid was not found in the extract, and syringaldehyde is one of the major compounds of pharmacopoeal extract, together with coumarin and o-coumaric acid. Samples from the lung and liver of Balb-C isogenic allergic pneumonitis bearing mice, treated with the same extract, were analyzed through GC-FID, and the fatty acid content was determined and analyzed. The results obtained by measuring the arachidonic acid (ARA) and docosahexaenoic acid (DHA) in the liver and lung of treated animals demonstrated that the fatty acid composition is distinct in both tissues, and that in the liver, only the DHA was altered as a result of the treatments. DHA is absent in the lung and in both organs, no significant difference in ARA production was observed. The aqueous extract, coumarin and o-coumaric acid stimulated DHA synthesis in the liver (p < 0.05).

O gênero Mikania é popularmente conhecido como "guaco" e é utilizado para tratar febre, reumatismo, resfriados e afecções respiratórias. Em trabalho prévio demonstramos sinergismo entre os componentes do extrato de M. laevigata para produzir os efeitos farmacológicos esperados, incluindo a cumarina e seu precursor ácido o-cumárico como marcadores. Muitas espécies de Mikania são produtoras de diterpenos ent-caurenos que apresentam atividade antispasmódica e relaxante da musculatura lisa. Buscando a padronização do extrato medicinal de guaco (preparado segundo a farmacopéia brasileira 1ª edição), este trabalho visou determinar a presença de ácido caurenóico através de CLAE-DAD e isolou siringaldeído através de CLAE semipreparativa, sendo que o primeiro não foi encontrado no extrato e o siringaldeído é um dos seus componentes majoritários. Camundongos isogênicos Balb-C portadores de pneumonite alérgica foram tratados com este extrato, e amostras de pulmão e fígado foram analisadas por CG-DIC quanto ao seu conteúdo de ácidos graxos. A quantidade de ácido araquidônico (ARA) e de ácido docosahexaenóico (DHA) encontrada demonstrou que a composição é distinta em ambos tecidos, e apenas a concentração de DHA hepático foi alterado em função do tratamento, o qual não foi encontrado no pulmão. Não foi detectada diferença significativa na produção de ARA. Tanto o extrato aquoso, quanto a cumarina e o ácido o-cumárico, estimularam a síntese de DHA no fígado (p < 0.05).